美洲栗子项目
接近一万棵树

2019年11月1日至2020年11月30日期间开展的活动

由于COVID-19大流行，今年对每个人来说都是充满挑战的一年，包括 我们在博彩平台养的美洲板栗研究和恢复项目. 但是我们的团队 适可而止，安全取得重大进展，并乐于分享 与你分享这些亮点.

异交授粉和组织培养- Hannah Pilkey(生产经理)

这个授粉季节是一个特殊的一年，纳入新的母树 和花粉类型促进遗传多样性的转基因育种计划. At 在养允许的地点，通过控制授粉生产了1400个坚果.1). 共有41棵母树用14种不同转基因产生的花粉授粉 强光条件下的树木. 这些坚果包括纯美洲栗子 T2s和t3. 注意，用于转基因的通用编号格式是T0 变换代，然后T1、T2、T3等. 为了十字架. 除了 美国的杂交品种，一些欧洲的，中国的和chinquapin的转基因杂交品种 也是为测试而生产的. 28棵母树用5种不同的植物授粉 T2转基因花粉类型产生超过600个坚果，构成T3代 异型杂交的后代的. 除了养的授粉外，异交也由 我们在印第安纳州、缅因州、佛蒙特州和弗吉尼亚州的TACF合作者. 总共… 今年夏天共生产了4845个坚果，其中包括T3代外交种. 约 这些坚果中有一半将继承OxO并组成T3代，这将是 这是迄今为止基因最多样化，抗枯萎病能力最强的后代. OxO表达测定 已经开始并将继续通过新年确定哪些坚果遗传 氧合氧基因.

尽管面临COVID限制的挑战，克隆繁殖和转基因的生产 树继续在组织培养实验室. 繁殖了100多棵转基因T2树， 植根了，今年又在地里播种了. 这些树木也开始生长了 在高光生长室中产生花粉，这些花粉将被冷冻储存 2021年授粉季节使用. 此外，四种新的转基因树，两种 其中来自弗吉尼亚州和印第安纳州，今年也被导入组织. 这些树木现在已经进入了生产的生根阶段，并将有助于 来年的多样化种植和花粉生产.

开发新的转基因品系以帮助多样性育种-琳达·麦克圭根(组织。 培养实验室经理)

2019年秋天，进行了一项改造美洲板栗体细胞的实验 携带p35S-OxO基因的胚胎. 实验包括五种栗子背景 (Alessi T2-1A、AxW3-46B、Bass Mountain #5-1B、Moss Lake 90016 C-21-1C和TG-8A) 以及三种选择方法(培养皿中的半固体介质，培养皿中的液体介质) RITA临时浸没式生物反应器和体外容器中的液体培养基). No 然而，两种治疗方法之间存在显著差异， 123个转基因新品系 生产. 这些细胞系目前正在再生成茎部培养物. 一次 这些行已经测试了插入副本号，只保留带有单个的行 基因拷贝，然后测试氧氧基因表达水平，只保留细胞系 那些表达量高到足以赋予疫病耐受性的，它们将被用来补充 多样性异交. 因为这些细胞系将把基因插入不同的 栗子基因组的位置，这消除了“连锁”可能带来的问题 和它们多样化的基因组将有助于多样化和地方适应 恢复种群的数量. 以下论文发表，以帮助他人使用 这些技术在未来:

McGuigan L.费尔南德斯，P.奥克斯，A.斯图尔特，K。., & 鲍威尔,W. (2020). 转换 美洲板栗(Castanea dentata).(博克)使用丽塔临时浸泡 生物反应器和体外容器. 森林, 11(11), 1196.

母树种子生产果园和持有地块-杰夫Zarnowski & 肖恩·萨 (外勤经理及助理外勤经理)

扩大了5个板栗种植区，为公众生产树木 以及长期的示范/研究种植. 为了保护所有的新植物， 额外1个.设置了7英里的鹿围栏. 目前有超过1600个 “亲爱的”美洲板栗在3600多个转基因和非转基因板栗中 我们田地里的树. 通过异种杂交，这些数量每年都会继续增加 以及新线路的开发. 我们希望在COVID-19限制之后 现在我们可以开始向公众开放参观这一激动人心的扩建项目. 请添加访问 你明年夏天的任务清单.

1. 情节A1. 4.47英亩的防护林. 最好的治疗方法的实验 恢复森林地区.
2. 情节A2. 3.8英亩的防护林.
3. 图B. 4.2英亩的示范果园，包含“亲爱的”美洲栗子-四 果园类型:露天阔叶林恢复与混合栗子/橡木/山胡桃木 森林树木，栗子/葡萄杂交，纯转基因美洲栗子园， 还有杂交转基因果园.
4. 情节C. 1.扩大了7英亩，用于种植一到三年的“母树” “亲爱的”美洲栗树持有地块，并与普通园林实验进行比较 “达林”树和其他栗树.
5. 伦纳德属性有效授粉距离研究- 0.42英亩.

图3. 左图是博彩平台养拉斐特路实验站的卫星地图 用新的种植区域标记和标记. 右边是莱纳德在海伯格的房产 纪念森林里的栗树从一个很小的， "亲爱的"美洲栗树园，让我们可以测试有效的授粉 恢复种植的距离

图4. 照料显著扩大的栗树种植并为 公共分配的树木，新的约翰迪尔w装载机与树铲移动较大 购买树木.

比尔·鲍威尔(教授和栗子项目主任)的最后一句话

我们有一个伟大的团队正在努力为您提供最好的，抗枯萎病的美洲板栗 树可能. 虽然进展有时似乎很慢，特别是与 监管部分的项目，我们实际上正在取得良好的进展考虑 我们正在做一些新的和创新的事情. 成为第一就意味着我们必须 为那些希望使用生物技术的强大工具来拯救他人的人提供道路 受威胁的树木，改善我们森林的健康. 我为我们的研究团队感到非常自豪 还有那些即使面临许多挑战也能专注于目标的学生 大流行. 虚拟世界就是一个很好的例子 授粉车间 举办，帮助市民学习如何越过“达令” 美洲板栗到野生型母树在他们的地区.

我也为我们所有的支持者感到骄傲，他们在经济上和奉献上都做出了贡献 在我们真正需要他们的时候. 美国农业部最近的公开评论期非常好 例子. 我们收到了2689条网赌平台申请不受监管的独特、积极的评论 状态(完整的请愿书可以在这里阅读). 我真诚地感谢每一个提交评论的人，我希望你能再次这样做 在至少两个以上的机会，我们将张贴. 监管机构 从未见过如此多的公众支持. 继续努力，我们会成功的 能够恢复美洲栗树.